热灭活问题
何谓热灭活?
一般是以 56℃，30 分钟来处理已解冻的血清，因为此加热步骤，可以使补体去活化，而补体所参与的反应有:溶细胞活性，平滑肌的收缩，肥大细胞和血小板组胺的释放，增强吞噬作用，淋巴细胞、巨噬细胞的趋化和激活。我需要灭活血清吗?
实验显示，经过正确处理的热灭活血清，对大多数的细胞而言是不需要的。经此处理过的血清对细胞的生长只有微小的促进，或完全没有任何作用，甚至通常因为高温处理影响了血清的质量，而造成细胞生长速率的降低。而经过热处理的血清，沉淀物的形成会显著的增多，这些沉淀物在倒立显微镜下观察，像是 "小黑点"，常常会让研究者误以为是血清遭受污染，而把血清放在 37C 环境中，又会使此沉淀物更增多，使研究者误认为是微生物的分裂扩增。因此若非必须，可以不需要做热处理这一步。热灭活过程
将融化的血清放在 56 摄氏度直接水浴 30min正确的方法
将融化的血清和盛有相同体积的水的烧杯同时放在 56 摄氏度中水浴，当烧杯中的温度计及指示达到 56 摄氏度时开始计时，30min 后灭活结束，整个过程中需要随时摇晃混匀
血清沉淀问题
明明是一瓶优质的血清，为什么偏偏会出现沉淀？
血清产品中出现沉淀属于常见现象，目前市面上所有品牌的血清产品均有出现沉淀的可能。血清沉淀是什么？
一类是絮状沉淀，这是血清中的纤维蛋白原在解冻过程中转化成纤维蛋白而形成的，絮状物较大时肉眼可见。这是因为在生产过程中，血清采集、过滤（3 次 0.1 μm 过滤）和灌装处理都是在低温条件下快速完成, 此时血清中纤维蛋白原（Fibrinogen）处于溶解状态。但在解冻之后, 血清中纤维蛋白原往往会发生凝集，形成肉眼可见的沉淀。一类是白色颗粒样沉淀，主要是血清中的磷酸钙的析出。也有部分脂蛋白、胆固醇、冷凝集素、玻连蛋白、胎球蛋白等一些脂质或蛋白质析出。在显微镜下可呈现为黑点样物质，有时会随着液体晃动，因此常常与细胞碎片或细菌污染混淆。血清沉淀会影响细胞培养吗？
cellmax在出厂前都会对血清进行一系列质检测试，确保血清质量达到严格标准。血清测试和细胞培养经验也表明，其沉淀成分不会影响血清作为细胞培养添加物的表现。这一点得到了众多客户和其他血清供应商的肯定。如何区分血清沉淀和污染？
纤维蛋白絮状沉淀有时会被误认为霉菌。镜下观察，纤维蛋白沉淀呈现透明絮状，形态无规则。而霉菌形态较规则，有明显的菌丝。二者还是比较容易分辨的。
磷酸钙沉淀在镜下为小黑点，常与细菌混淆。细菌通常会在1-2天内迅速增殖，导致培养基浑浊。而磷酸钙沉淀在37℃会缓慢析出，但不会使培养基浑浊。将血清取样空培养时，可以明显看到黑色颗粒且可能随培养时间增加而增多，该现象为高温下析出增多现象并非污染，因此不建议采用空培养作为血清检菌的方式。若您确实对血清产品有污染疑虑，建议取少量血清涂布LB平板进行检菌。怎样操作可以尽量避免沉淀出现？
1. 正确解冻
首先，应按照逐步解冻的方式正确解冻血清：从-20℃取出后，置于2-8℃冰箱过夜缓慢解冻，最后置于室温完成解冻。如果直接从-20℃拿到室温或水浴融化将会加速沉淀的产生。在解冻过程中，时不时缓慢摇晃瓶子，减少沉淀的产生。融化后上下颠倒混匀，不要剧烈摇晃，为避免反复冻融，建议将血清分装使用。血清出现沉淀和血清的品质没有必然关系，并不会影响细胞生长。然而过多的沉淀可能会妨碍实验者对细胞的观察，有时难以和微生物污染区分，影响实验者对细胞状态的判断。热灭活
37℃培养
反复冻融
伽马射线照射
2-8℃长期保存
长时37℃或室温放置
长期保存于可自动化霜的冰箱中（温度不稳定）
血清沉淀的形成机理多种多样，具体的机理尚不十分明确。我们尚不能准确预测和控制血清沉淀的产生。目前市面上所有品牌的血清产品都存在沉淀现象，这一点可以在各品牌官方网站上关于沉淀问题的声明上得到证实。
Q.出现血清沉淀该如何处理？
可以将血清分装到无菌的离心管中，400g 离心 1~2 分钟，取上清配制完全培养基。不建议过滤去除沉淀，因为沉淀会堵住滤膜导致过滤效果下降。Q.絮状物沉淀是否影响使用，能否更换？
沉淀影响巨噬细胞的培养，对于其他细胞并不会影响使用。但如果您觉得沉淀可能会妨碍您对细胞的观察，cellmax支持不开封的情况下免费帮您更换。Q.之前室温解冻血清一直都没有问题，需要按照科学标准方法操作解冻吗？
2-8℃冰箱过夜缓慢解冻，最后置于室温完成解冻是最科学减小沉淀的方式，建议按照标准化操作，但如果您一直室温解冻血清且对实验没有影响那为了项目的稳定及习惯性可以沿用，但非标准化解冻可能会影响血清的效期。Q.别的品牌的血清没有沉淀，为什么你们的血清有沉淀？
血清中的沉淀不管谁家的血清都是有的，只是或多或少的问题（这根据采血季节也有关），包括进口血清： 1）GIBCO 的网站上说“GIBCO 的胎牛血清没有预老化,如果存放在2-8℃，血清中的各种蛋白或酯类有可能会凝聚析出,出现沉淀或浑浊，这种现象不会影响血清对细胞的促生长作用.我们建议把血清存放在–20℃，并 避免反复冻融。
2）Sigma 胎牛血清说明书中说: “在熔化过程中浑浊多絮状沉淀，这种现象对多数血清来说是正常的，并不影响其使用质量。但它影响血清的外观，影响瓶与瓶之间的一致性。
Q.血清一定要进行热灭活吗？
对大多数的细胞而言是不需要的。经此处理过的血清对细胞的生长只有微小的促进，或完全没有任何作用，甚至因为高温处理影响了血清的质量。具体是否灭活看实验需求。